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酶標儀實際上就是一臺變相的光電比色計或分光光度計。

是一種單通道自動進樣的酶標儀工作原理圖。光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光，進入塑料微孔極中的待測標本，該單色光一部分被標本吸收，另一部分則透過標本照射到光電檢測器上。光電檢測器將透射過待測標本后強弱不同的光信號轉換成相應的電信號，電信號經前置放大、對數放大、模數轉換等處理后，送入微處理器進行數據處理，轉換成相應的濃度，后由顯示器和打印機輸出結果。

酶標儀原理是使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本（測定其中的抗體或抗原）和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開，后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化變為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據顏色反應的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地放大反應效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。